Biologia molekularna 04-BIO-BIOM-SP5

Wykłady:
Struktura i właściwości DNA i RNA. Budowa i działanie genów prokariotycznych i eukariotycznych. Organizacja genomu różnych organizmów. Replikacja DNA. Uszkodzenia, naprawa i rekombinacja DNA. Transkrypcja u Procaryota i Eucaryota. Zróżnicowanie budowy i funkcji RNA. Translacja i jej regulacja. Białka - struktura i właściwości. Podstawowe metody i techniki badania DNA, RNA i białek. Zastosowanie biologii molekularnej w genetyce, hodowli roślin, medycynie i sądownictwie. Sekwencjonowanie DNA - metody, sekwencjonowanie genomu człowieka. Perspektywy biologii molekularnej.

Ćwiczenia:
Przygotowanie do pracy w laboratorium biotechnologicznym – szkolenie BHP, pipetowanie, obsługa sprzętu laboratoryjnego. Zasady przygotowania roztworów – stężenia molowe i procentowe, rozcieńczanie roztworów. Metody izolacji kwasów nukleinowych z materiału roślinnego (metoda Davisa, metoda z zastosowaniem buforu CTAB). Elektroforetyczna detekcja wyizolowanego DNA. Ocena stężenia i jakości DNA roślinnego na żelu. Izolacja białek z materiału roślinnego. Oznaczanie stężenia białek metodą Bradforda. Rozdział białek na żelu poliakryloamidowym w warunkach denaturujących (SDS-PAGE). Transfer białek na błonę nitrocelulozową. Wykrywanie określonych białek metodą Western blot. Izolacja całkowitego RNA za pomocą odczynnika TRI. Elektroforeza agarozowa wyizolowanego RNA. Spektrofotometryczne oznaczanie stężenia i czystości RNA. Metoda PCR - programowanie termocyklera, zasady optymalizacji reakcji, amplifikacja wybranego fragmentu DNA. Elektoroforeza produktów PCR w żelu agarozowym. Oczyszczanie produktu reakcji. Analiza wielkości produktów PCR za pomocą programu VNTR.